实验教学
分子生物学实验教学内容和学时分配
(明确各章节教学内容、教学重难点和学时分配,明确教学内容与课程目标的对应关系;重难点以※标注。混合式教学课程还需明确线上/线下教学内容和学时分配。)
1. 基因的扩增与检测(3学时)
【实验名称】:GFP基因的PCR扩增DNA+琼脂糖电泳检测
【支撑的课程目标】:
1)了解琼脂糖凝胶电泳检测DNA与PCR的基本原理。
2)掌握分子生物学操作技术操作和PCR仪的使用。
【教学内容】:
1)PCR与琼脂糖凝胶电泳的基本原理与操作。
2)PCR引物的设计。
【教学方式】:
教师讲授PCR与琼脂糖凝胶电泳的相关理论,说明实验目的、原理及其实验要求,简单说明实验内容和操作中应当注意的问题。由学生独立完成实验操作和结果记录的过程。教师跟踪整个实验进程,解决学生实验中提出的问题,指正学生操作中的失误,确保实验顺利有序进行。
[预习要求]:
熟悉细胞内DNA复制的原理,掌握DNA复制的相关理论。
2. 目的基因的回收纯化(3学时)
【实验名称】:PCR扩增GFP基因的切胶纯化
【支撑的课程目标】:
1)学习并了解琼脂糖凝胶中的DNA回收纯化的基本原理。
2)练习并掌握琼脂糖凝胶中的DNA回收纯化的实验技术。
【教学内容】:
琼脂糖凝胶回收试剂盒工作的基本原理与操作
【教学方式】:
教师讲授实验目的、原理及其实验要求,简单说明实验内容和操作中应当注意的问题。由学生独立完成实验和结果记录的过程。教师跟踪整个实验进程,解决学生实验中提出的问题,指正学生操作中的失误,确保实验顺利有序进行。
【预习要求】:
熟悉DNA分子的物理与化学特性。
3. 大肠杆菌的培养(3学时)
【实验名称】:大肠杆菌的培养
【支撑的课程目标】:
1) 掌握大肠杆菌的接种与培养技术。
2) 熟悉大肠杆菌培养基的配制。
【教学内容】:
大肠杆菌的单克隆挑取与扩大培养。
【教学方式】:
教师讲授并说明实验目的、原理及其实验要求,简单说明实验内容和操作中应当注意的问题。教师跟踪整个实验进程,解决学生实验中提出的问题,指正学生操作中的失误,确保实验顺利有序进行。
【预习要求】:
了解细菌繁殖的基本知识
4. 质粒DNA 的提取(3学时)
【实验名称】:质粒DNA的提取与电泳检测
【支撑的课程目标】:
1)学习并了解质粒DNA提取的原理
2)练习并掌握质粒DNA提取的方法
【教学内容】:
质粒DNA提取的原理,方法及实验操作。
【教学方式】:
教师讲授实验目的、原理及其实验要求,简单说明实验内容和操作中应当注意的问题。教师指导并跟踪整个实验进程,解决学生实验中提出的问题,指正学生操作中的失误,确保实验顺利有序进行。
【预习要求】:
了解质粒DNA与染色体DNA的异同。
5、质粒DNA的酶切(3学时)
【实验名称】:质粒DNA的酶切与电泳检测
【支撑的课程目标】:
1)了解DNA限制性内切酶的使用和选取方法
1)学习并掌握DNA酶切这一分子生物学常用技术
【教学内容】:
1)DNA限制性内切酶的酶切位点与使用方法。
2)使用DNA限制性内切酶切割DNA的实验操作。
3)酶切产物的鉴定。
【教学方式】:
教师讲授实验目的、原理及其实验要求,简单说明实验内容和操作中应当注意的问题。教师指导并跟踪整个实验进程,解决学生实验中提出的问题,指正学生操作中的失误,确保实验顺利有序进行。
【预习要求】:
DNA分子的物理化学性质与核酸酶的工作原理。
6、 DNA重组:目的基因与质粒的连接(3学时)
【实验名称】:质粒DNA与GFP基因的连接与电泳检测
【支撑的课程目标】:
学习外DNA重组的原理和方法,掌握T-A克隆重组技术,能够利用T-A克隆重组技术构建重组子。
【教学内容】:
1)DNA重组的原理与方法。
2)T-A克隆重组技术的原理与实验操作。
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉DNA重组的概念。
7、感受态细胞的制备(3学时)
【实验名称】:大肠杆菌感受态细胞的制备
【支撑的课程目标】:
学习并掌握感受态细胞的制备方法,能够完成大肠杆菌感受态细胞的制备。
【教学内容】:
1)大肠杆菌感受态细胞的概念,制备方法与应用
2)制备大肠杆菌感受态细胞的实验操作
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
大肠杆菌的繁殖及其培养的原理与操作。
8、外源基因的转化(3学时)
【实验名称】:携带GFP基因重组子的转化
【支撑的课程目标】:
学习并掌握基因转化的原理和方法,会利用热激法进行DNA分子的转化。
【教学内容】:
1) DNA分子转化的原理
2) 热激法转化DNA重组子的操作
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉DNA重组,感受态细胞制备。
9、转化大肠杆菌的倒板培养(3学时)
【实验名称】:转化大肠杆菌的倒板培养
【支撑的课程目标】:
学习并掌握转化大肠杆菌的倒板培养的操作方法,能够独立进行转化大肠杆菌的倒板培养操作。
【教学内容】:
转化大肠杆菌倒板培养实验操作的方法。
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉大肠杆菌的培养方法。
10、重组大肠杆菌的筛选(3学时)
【实验名称】:重组大肠杆菌的蓝白斑筛选
【支撑的课程目标】:
学习转化大肠杆菌阳性克隆的蓝白斑筛选方法的原理,掌握蓝白斑与抗生素联合双筛法的操作方法。
【教学内容】:
1)转化大肠杆菌蓝白斑筛选法的原理。
2)抗生素与蓝白斑联合双筛法的实验操作方法。
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉大肠杆菌半乳糖代谢的相关知识。
11、转化大肠杆菌的扩大培养(3学时)
【实验名称】:重组大肠杆菌的阳性克隆培养
【支撑的课程目标】:
学习转化大肠杆菌阳性克隆的扩大培养的意义。掌握扩大培养的方法与原理,能独立进行转化大肠杆菌的扩大培养。
【教学内容】:
阳性克隆的挑取方法与扩大培养的实验操作。
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉大肠杆菌的培养方法。
12、重组子的鉴定(3学时)
【实验名称】:重组质粒DNA的检测
【支撑的课程目标】:
学习重组子的鉴定方法,能够使用PCR法与酶切法对重组质粒DNA进行鉴定。
【教学内容】:
1)重组子鉴定的方法与原理。
2)PCR法与酶切法进行重组质粒DNA鉴定的实验操作方法。
【教学方式】:
教师主要讲授实验目的、原理及其实验要求。教师跟踪整个实验进程,要求学生在一段时间内安排好实验进程,如实记录实验中出现的现象和问题,并做出自己的分析和判断。
【预习要求】:
熟悉PCR与酶切的操作方法。